RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項
線性PEI轉(zhuǎn)染試劑是一種陽離子聚合物,分子量25000,它能與核酸形成復(fù)合物,并使該復(fù)合物進(jìn)入哺乳動物細(xì)胞。線性PEI轉(zhuǎn)染試劑廣適用于常見細(xì)胞系,如HEK-293、HEK293T、HepG2、Hela、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3和Sf9等。該試劑即使在有血清存在的情況下,它仍然能的將核酸導(dǎo)入細(xì)胞。78bio公司提供的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑具有如下優(yōu)點:優(yōu)越的轉(zhuǎn)染效率,重組蛋白的高表達(dá)水平,與含血清的培養(yǎng)基相兼容,低細(xì)胞毒性,易于操作?質(zhì)量控制每批次線性PEI轉(zhuǎn)染試劑均經(jīng)過轉(zhuǎn)染測試。將eGFP表達(dá)質(zhì)粒(GeneCopoeiaCat.No.EX-EGFP-Lv01)用EndoFectinTM-Plus轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)入亞融合狀態(tài)的HEK-293細(xì)胞,轉(zhuǎn)染16h后,超過95%的細(xì)胞表達(dá)eGFP。哪家有GMP等級的PEI轉(zhuǎn)染試劑?RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項
對大多數(shù)細(xì)胞來而言,每1μgDNA使用3.0μLPEIMAX轉(zhuǎn)染試劑都能獲得較高轉(zhuǎn)染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1.5~4μL體積線性PEIMAX轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行優(yōu)化。.PEIMAX(MW40,000)為Polysciences公司生產(chǎn)的化合物產(chǎn)品,每批產(chǎn)品出廠前都經(jīng)過嚴(yán)格的檢測,保證每批產(chǎn)品都100%合格、穩(wěn)定且品質(zhì)高,但由于作為轉(zhuǎn)染試劑使用過程中有很多實驗室因素(配置方法,PH,水純度,稱量的準(zhǔn)度,dnaRNA純度,細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞品系…)造成溶解出現(xiàn)問題或者轉(zhuǎn)染效率出現(xiàn)差異,所以廠家只受理該產(chǎn)品純度,分子量及重量缺失破損等相關(guān)投訴,針對極個別客戶溶解問題和轉(zhuǎn)染效率問題我們能友善解決。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!浙江高性價比PEI轉(zhuǎn)染試劑哪里有賣GMP等級的PEI轉(zhuǎn)染試劑?
瞬時轉(zhuǎn)染方法:1.接種細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前一晚,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細(xì)胞濃度,將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,每個孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時,請用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞:直接向每個孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時,去除生長培養(yǎng)基,替換成無血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復(fù)合物。轉(zhuǎn)染1.5h后,添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。4.孵育細(xì)胞和分析結(jié)果:在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細(xì)胞至可以分析檢測。轉(zhuǎn)染后5h即可檢測到轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)。請自行確定適合檢測時間。
線性PEI轉(zhuǎn)染試劑是一種陽離子聚合物,分子量25000,它能與核酸形成復(fù)合物,并使該復(fù)合物進(jìn)入哺乳動物細(xì)胞。線性PEI轉(zhuǎn)染試劑廣適用于常見細(xì)胞系,如HEK-293、HEK293T、HepG2、Hela、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3和Sf9等。該試劑即使在有血清存在的情況下,它仍然能的將核酸導(dǎo)入細(xì)胞。78bio公司提供的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑具有如下優(yōu)點:優(yōu)越的轉(zhuǎn)染效率,重組蛋白的高表達(dá)水平,與含血清的培養(yǎng)基相兼容,低細(xì)胞毒性,易于操作?質(zhì)量控制每批次線性PEI轉(zhuǎn)染試劑均經(jīng)過轉(zhuǎn)染測試。將eGFP表達(dá)質(zhì)粒(GeneCopoeiaCat.No.EX-EGFP-Lv01)用EndoFectinTM-Plus轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)入亞融合狀態(tài)的HEK-293細(xì)胞,轉(zhuǎn)染16h后,超過95%的細(xì)胞表達(dá)eGFP。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)的產(chǎn)品信息,歡迎咨詢上海曼博生物!用PEI轉(zhuǎn)染試劑時出現(xiàn)沉淀是什么原因?
注意事項質(zhì)粒質(zhì)量:請務(wù)必使用高質(zhì)量轉(zhuǎn)染級無內(nèi)質(zhì)粒(推薦使用QIAGEN或者M(jìn)N公司去內(nèi)質(zhì)粒提取試劑盒)。通過260nm光吸收測定DNA濃度,260nm/280nm比值確定DNA純度(比值應(yīng)該在1.8~2.0的范圍之內(nèi))。如有可能,請通過瓊脂糖凝膠電泳檢測質(zhì)粒的完整性。細(xì)胞條件:使用適當(dāng)保存和經(jīng)常傳代的健康細(xì)胞。確保培養(yǎng)基沒有被細(xì)菌、或支原體污染。如果細(xì)胞是近期復(fù)蘇的液氮凍存細(xì)胞,請在轉(zhuǎn)染前至少傳代兩次。建議使用GIBCO或者78bio公司血清培養(yǎng)細(xì)胞。PEI轉(zhuǎn)染試劑對復(fù)合物孵化的時間是有要求的,一般建議5~20分鐘之間。國產(chǎn)PEI轉(zhuǎn)染試劑好用么
如何辨別假的PEI轉(zhuǎn)染試劑?RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項
穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法:
1.接種細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細(xì)胞濃度,將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,每個孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%。
2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個需要客戶自行摸索配比,每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同)。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時,請用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。
3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞:直接向每個孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時,去除生長培養(yǎng)基,替換成無血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復(fù)合物。轉(zhuǎn)染1.5h后,添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。
4.孵育細(xì)胞和分析結(jié)果:在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細(xì)胞至可以分析檢測。轉(zhuǎn)染后5h即可檢測到轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)。
歡迎咨詢PEI產(chǎn)品!RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項
上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司位于自由貿(mào)易試驗區(qū)達(dá)爾文路16幢104室,擁有一支專業(yè)的技術(shù)團隊。專業(yè)的團隊大多數(shù)員工都有多年工作經(jīng)驗,熟悉行業(yè)專業(yè)知識技能,致力于發(fā)展PL Bioscienc,Quan-Lab,Polysciences,Sirion Biote,CN-Bio,Dharmacon,Horizon,Pfenex,Visual Prote的品牌。公司不僅*提供專業(yè)的生物醫(yī)藥科技(人體干細(xì)胞、基因診斷與zhiliao技術(shù)開發(fā)和應(yīng)用除外)領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā)、自有技術(shù)轉(zhuǎn)讓,并提供相關(guān)的技術(shù)咨詢和技術(shù)服務(wù);計算機軟件的開發(fā)、設(shè)計、制作(音像制品、電子出版物除外)、銷售自產(chǎn)產(chǎn)品;實驗室試劑及耗材(藥品、危險品除外)、化工原料及產(chǎn)品(除危險化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、煙花爆竹、民用baozha物、易制毒化學(xué)品)、儀器儀表、機械設(shè)備、電子設(shè)備、塑料制品、玻璃制品、辦公用品、電子產(chǎn)品的批發(fā)、進(jìn)出口、傭金代理(拍賣除外)。【依法須經(jīng)批準(zhǔn)的項目,經(jīng)相關(guān)部門批準(zhǔn)后方可開展經(jīng)營活動】,同時還建立了完善的售后服務(wù)體系,為客戶提供良好的產(chǎn)品和服務(wù)。誠實、守信是對企業(yè)的經(jīng)營要求,也是我們做人的基本準(zhǔn)則。公司致力于打造的血小板裂解液,WB自動孵育系統(tǒng),微流控器官芯片,藍(lán)牙無線標(biāo)簽機。
本文來自東西博庫網(wǎng):http://www.mldyw.com.cn/Article/39a54399417.html
黑龍江降壓dc-dc電源模塊供求
DC-DC轉(zhuǎn)換器的使用有利于簡化電源電路設(shè)計,縮短研制周期,實現(xiàn)比較好指標(biāo)等,被廣用于電力電子、科研、工控設(shè)備、通訊設(shè)備、儀器儀表、交換設(shè)備、接入設(shè)備、移動通訊、路由器等通信領(lǐng)域和工業(yè)控制、汽車電子、 。
ProportionalValve,PV)則調(diào)節(jié)壓力和流率。比例閥主要的基本特性是將輸入信號轉(zhuǎn)換為特定的輸出信號。比例閥通常包括兩個器件—一個導(dǎo)向控制和一個閥單元。導(dǎo)向控制由兩個2/2通路導(dǎo)向閥或一個 。
深圳市永造自動化設(shè)備有限公司,是一家致力于提供先進(jìn)自動化裝配測試和解決方案的設(shè)備集成公司。數(shù)控旋鉚設(shè)備,新升起的新型的機電一體化設(shè)備,省能源,低噪音,環(huán)保,速度快,精度高。旋鉚機是選用規(guī)范廠家出產(chǎn)的節(jié) 。
雙螺桿螺紋元件是通常用于以下領(lǐng)域:1.塑料加工:在塑料成型中,雙螺桿擠出機通常用于生產(chǎn)高粘度塑料、工程塑料和特殊塑料等,而雙螺桿螺紋元件則是擠出機的重要部件之一,可以有效地實現(xiàn)高效、穩(wěn)定的擠出加工。2 。
虛擬拍攝與傳統(tǒng)的實拍的區(qū)別有哪些?1、視覺效果虛擬拍攝的視覺效果可以達(dá)到非常逼真的程度,因為它可以通過計算機模擬出各種場景、角色、特別的效果等。而實拍則受到天氣、場地等因素的限制,視覺效果相對較差。2 。
10—20cm。 、邊溝回填土:直埋光纜沿公路排水溝敷設(shè),遇石質(zhì)溝時,光纜埋深≥0.4米,回填土15厘米,邊溝回填土應(yīng)注意如下問題: 1)直埋光纜0.4米時要求光纜在溝底有25厘米的回填土,余15厘米 。
根據(jù)帳篷的不同,有不同的搭建方式,分為自動式搭帳和純手工搭帳兩種方式。對于新手來說,自動帳方便很多。目前常見的自動帳篷采用的技術(shù)多為彈簧式或液壓式兩種。其中,液壓式較彈簧式偏貴,但技術(shù)較彈簧式也略先進(jìn) 。
苯甲酸芐酯在紡織助劑上的應(yīng)用同類產(chǎn)品比較:甲基(二甲基)萘 :勻染效果:一般,安全環(huán)保綜合性能 : 差 。鄰苯類酯 :勻染效果:一般,安全環(huán)保綜合性能 : 差 。冬青油 :勻染效果:好,安全環(huán)保綜合性 。
工程文件管控非常重要,70%的工程風(fēng)險都是溝通不暢及文件缺失導(dǎo)致的。項目文件管控,不是簡單的資料檔案管理,需要對文件收發(fā)、審批流轉(zhuǎn)、關(guān)閉歸檔全過程做好控制。傳統(tǒng)的文件管理方式溝通效率低、過程跟蹤混亂, 。
泡沫滅火劑可撲救可燃易燃液體的有效滅火劑,它主要是在液體表面生成凝聚的泡沫漂浮層,起窒息和冷卻作用。泡沫滅火劑分為化學(xué)泡沫、空氣泡沫、氟蛋白泡沫、水成膜泡沫和抗溶性泡沫等。適用范圍。泡沫滅火劑是與水混 。
定期維護(hù)的周期可根據(jù)吸幕機的使用頻率來決定,吸幕機的日常維護(hù)檢查的要點如下:1、清擦吸幕電機。及時用干抹布清理吸幕機機殼外部的灰塵、油泥千萬別使用水洗)。2、檢查和清擦電機接線端子。檢查接線盒接線螺絲 。